Skip to content

Autoodporność specyficzna względem narządu u myszy, których repertuar komórek T jest kształtowany przez pojedynczy antygenowy peptyd ad 5

3 miesiące ago

861 words

Tak było nawet wtedy, gdy komórki stymulowano komórkami śledziony B2H TKO wyrażającymi ten kompleks jako pojedynczy gatunek na najwyższym poziomie spośród trzech linii (22) (danych nie pokazano). Jednakże po trzech lub czterech rundach stymulacji komórkami śledziony B2H TKO w obecności cytokin, śledzionowe komórki T CD4 + z myszy H3 TKO, ale nie te z myszy TKO B2L, wykazały zdecydowaną odpowiedź proliferacyjną na komórki śledziony B2H TKO (Figura 3c). ). Ta odpowiedź nie była obserwowana w przypadku komórek śledziony TKO i była blokowana przez mAb YAe, który jest specyficzny dla kompleksu I-Ab . E (52-68 (29). Gdy komórki T CD4 + od myszy H3 TKO stymulowano komórkami śledziony B2H TKO, komórki te wytwarzały IFN-y. i IL-4 (Figura 3d), ale nie IL-2 (dane nie przedstawione). Wyniki te wskazują, że peryferyjny repertuar komórek T myszy H3 TKO, ale nie myszy B2KO TKO, obejmuje samoreaktywne komórki T CD4 +, które mogą być aktywowane przez kompleks I-Ab . E (52-68. Figura 3 Fenotypowa i funkcjonalna analiza dla samodotywności komórek T CD4 + u myszy H3 TKO. (a) Ekspresja CD62L i CD44 na śledzionowych komórkach T CD4 + z myszy TKO, H3 TKO i B2L TKO. Wskazano proporcje komórek CD62L + CD44a, CD62L + CD44 + i CD62LAP CD44 +. (b) Ekspresja CD25 na śledzionowych komórkach CD4 + z myszy TKO, H3 TKO i B2L TKO (górne panele) i porównanie proporcji limfocytów T CD4 + CD25 + w tych trzech liniach (dolny panel). TKO, n = 4; H3 TKO, n = 7; B2L TKO, n = 4. (c i d) Po trzech lub czterech rundach stymulacji śledziony CD4 + komórek T z H3 TKO (wypełnione słupki) lub B2L TKO (otwarte słupki) myszy z napromienionymi komórkami śledziony B2H TKO w obecności cytokin żywe komórki (1 x 105 / studzienkę) hodowano z napromieniowanymi komórkami śledziony (1 x 106 / studzienkę) z myszy B2KO TKO lub TKO w obecności lub nieobecności YAe (20 ug / ml). Wyniki przedstawiają średnią włączenia [3H] tymidyny w duplikowanych hodowlach (c), a średnią i SD produkcji cytokin w potrójnych hodowlach (d). W doświadczeniach przedstawionych w literach cid, przygotowano trzy niezależne, krótkoterminowo hodowane linie komórek T CD4 + od myszy H3 TKO dotkniętych chorobą. B2H, B2H TKO. Następnie zbadaliśmy kwestię, czy rozwój obwodowego zapalenia nerwów jest mediowany przez limfocyty T CD4 + w eksperymentach z adaptacyjnym transferem. W tym celu przygotowaliśmy limfocyty T CD4 + z obwodowych węzłów chłonnych myszy T3 H3, które cierpiały na zapalenie nerwu obwodowego, i rozszerzyliśmy limfocyty T CD4 + przez stymulację ich komórkami śledziony B2H TKO w obecności mAb anty-CD3 i cytokin. Podczas gdy nerwy kulszowe myszy chimerowych B2L-H3 nie wykazywały nacieku komórek (tabela 1), zaszczepienie komórkami T CD4 + od myszy H3 TKO dotkniętych zapaleniem obwodowym nerwu, wraz z komórkami szpiku kostnego B2L TKO, spowodowało infiltrację komórek T CD4 + i makrofagi CD11b + we wszystkich przypadkach (Tabela i Figura 4). Wyniki te wskazują, że proces immunologiczny z udziałem komórek T CD4 + jest zaangażowany w rozwój zapalenia nerwu obwodowego. Figura 4 Adoptywne przeniesienie komórek węzłów chłonnych CD4 + od myszy H3 TKO dotkniętych chorobą powoduje zapalenie nerwów obwodowych. Aktywowane limfocyty T CD4 + z węzłem chłonnym od dotkniętych myszy TKO H3 przeniesiono do napromieniowanych, 7-tygodniowych myszy H3 TKO, wraz z komórkami szpiku kostnego B2L TKO. Sekcje nerwu kulszowego zostały przygotowane i zabarwione na CD11b (zielony) i CD4 (czerwony) w 10. 13 tygodni po transferze. Podwójny obraz immunofluorescencyjny (a) nakłada się na obraz z kontrastem fazowym tego samego pola (b). Pasek skali reprezentuje 40 .m. U myszy H3 TKO, cząsteczki I-Ab MHC klasy II, które służą jako ligandy dla TCR ulegających ekspresji na komórkach T CD4 +, tworzą kompleksy z E (52-68. Aby zbadać, czy zapalenie nerwu obwodowego obejmuje samo-reaktywność wobec kompleksu I-Ab . E (52-68, podawano mg myszy mAb YAe myszom H3 TKO co 3. 4 dni, rozpoczynając w wieku 7 tygodni. Podczas gdy cztery z siedmiu myszy H3 TKO podobnie traktowanych kontrolnym Ab o dopasowanym pod względem izotypu rozwoju zapalenia nerwów obwodowych osiągnęło wiek 16 tygodni, żaden z tych leczonych YAe nie wykazywał klinicznych objawów choroby. Gdy nerwy kulszowe analizowano pod kątem infiltracji komórek CD11b + w wieku 16 tygodni, stwierdzono, że podawanie YAe znacznie poprawia ocenę histologiczną (Tabela 1). Oczywiste jest, że hamujący wpływ YAe na rozwój choroby nie wynika z eliminacji komórek prezentujących antygen, ponieważ proporcje komórek dendrytycznych i komórek B eksprymujących kompleks I-Ab | Ey52-68 w śledzionie nie uległy istotnej zmianie. przez traktowanie YAe (Figura 5). Figura 5 Porównanie komórek B i komórek dendrytycznych wyrażających kompleks I-AbpEs-52-68 przed i po leczeniu YAe. Komórki śledziony (a) i frakcje wzbogacone w dendrytyczne komórki (b) przygotowano z myszy B2H TKO z (po lewej) lub bez (po prawej) traktowaniu YAe, i wybarwiono mAb YAe i anty-CD45R (do wykrywania komórek B) lub 33D1. (do wykrywania śledzionowych komórek dendrytycznych)
[podobne: zapalenie woreczka łzowego, fitmed, młody jęczmień green ways ]
[hasła pokrewne: kotlety mielone bez jajka, sennik pocałunek w policzek, zapalenie woreczka łzowego ]