Skip to content

Elektrofile Triterpenoidów (avicyny) aktywują wrodzoną odpowiedź na stres poprzez regulację redoks baterii genu ad 5

2 miesiące ago

733 words

GSH powoduje, że wiele związków elektrofilowych jest mniej toksycznych, tworząc z nimi koniugaty. Reakcje te wymagają działania GST, wszechobecnej rodziny enzymów odtruwających. Figura 3b pokazuje zależny od czasu wzrost poziomów GSH w komórkach Hep G2 traktowanych avicin D2, które zaczynają spadać po 3 godzinach leczenia. Skromny wzrost, a następnie obniżenie poziomów GSH można wyjaśnić stałym wykorzystaniem GSH w komórce, a także możliwością, że avicyna może wiązać się z cysteiną w GSH, tym samym ją gasić. Jest to zgodne ze zwiększoną aktywnością GPx i GST obserwowaną w tych komórkach po traktowaniu avicyną D (Figura 3, c i d). W potwierdzeniu wzrostu aktywności GPx i GST obserwowaliśmy spadek peroksydacji lipidów zarówno w komórkach traktowanych avicin jak iw systemie bezkomórkowym (Supplemental Figure 3, http://www.jci.org/cgi/content/ pełny / 113/1/65 / DC1). Uważa się, że komórki w hodowli tkankowej podlegają znacznie wyższemu stresowi oksydacyjnemu niż komórki in vivo (23). Zdolność awikwin do obniżania poziomu komórkowego H2O2, jak również nadtlenków lipidów w tych warunkach może wyjaśniać krótki okres półtrwania tych białek detoksyfikacyjnych. Figura 3 Wpływ avicyny D na poziomy TRXred (a), GSH (b), GPx (c) i GST (d). Komórki Hep G2 traktowano avicyną D (2 .g / ml) przez 0-300 minut, a komórki poddawano lizie metodą zamrażania-rozmrażania. Poziomy lub aktywność różnych białek mierzono zgodnie z opisem w Metodach. Wyniki przedstawione dla każdego białka są reprezentatywne dla trzech różnych testów. Badania in vivo Grubość naskórka. Myszy eksponowane na UVB przez 10 tygodni wykazują zwiększony poziom przerostu i hiperkeratozę, z ogniskowymi plamami dysplazji (Figura 4a). Jak pokazano na rycinie 4b, wstępne leczenie skóry z AE spowodowało znaczny spadek rozrostu. Zastosowanie AE po napromieniowaniu UVB było mniej skuteczne w zmniejszaniu rozrostu (dane nie przedstawione). Wyniki te zostały potwierdzone przez barwienie BrdU (Supplemental Table 1, http://www.jci.org/cgi/content/full/113/1/65/DC1). Myszy SKH-1 leczone przez 2 tygodnie samą AE nie wykazywały zmian grubości naskórka, proliferacji komórek i apoptozy. Potwierdza to naszą wcześniejszą obserwację u myszy SENCAR, w których 4-tygodniowe leczenie samą AE nie miało wpływu na grubość naskórka lub komórkową skórę (3). Figura 4 Reprezentatywne mikrofotografie pokazujące wpływ AE na rozrost naskórka (barwienie a i b, H & E, x 200), mutacje p53 (c i d, barwienie H & E, x 200) i apoptozę (barwienie ei F, x 400) w bezwłosej skórze myszy SKH-1. Myszy traktowane acetonem (a, c i e) lub 0,4 mg AE (b, d, i f) napromieniano UVB, jak opisano w Metodach. mutacje p53. Białko p53 odgrywa kluczową rolę w komórkowej odpowiedzi na uszkodzenie DNA wywoływane przez UVB. Warstwy podstawne i ponadpodstawne naskórka myszy, które były eksponowane na UVB przez 10 tygodni, wykazywały intensywną immunoreaktywność p53 (Figura 4c) w postaci mikroskopijnych skupisk komórek preneoplastycznych z nadekspresją zmutowanego p53. Wstępne leczenie za pomocą AE spowodowało znaczny spadek liczby zmutowanych komórek p53-dodatnich w tych klastrach (Figura 4d i Tabela uzupełniająca 1, http://www.jci.org/cgi/content/full/113/1/65/ DC1). Wyniki te sugerują, że AE może ewentualnie odwrócić szkodliwy proces karcynogenezy skóry poprzez hamowanie indukowanych przez UV mutacji p53 za pomocą jednego lub więcej z następujących mechanizmów: (a) usuwanie uszkodzonych komórek, (b) tłumienie stresu oksydacyjnego i (c) naprawa uszkodzeń DNA. Apoptoza. Na podstawie zmniejszenia mutacji p53 ocenialiśmy wpływ AE na apoptozę komórek skóry. W porównaniu z nieleczoną, eksponowaną na UVB skórą (Figura 4e), skóra wstępnie traktowana AE przed napromieniowaniem UVB wykazywała zwiększoną liczbę komórek apoptotycznych (Figura 4f i Tabela Uzupełniająca 1, http://www.jci.org/cgi/content / full / 113/1/65 / DC1). Uszkodzenia oksydacyjne i immunohistochemia enzymów fazy 2. Wiadomo, że wolne rodniki powodują uszkodzenie DNA poprzez pękanie nici i / lub tworzenie zmodyfikowanych zasad, takich jak 8-OH-dG. Leczenie UVB doprowadziło do około czterokrotnego wzrostu stosunku 8-OH-dG na 100 000 pmol dG (105 dG) (pmol / pmol) w DNA myszy kontrolnych (Figura 5). Zastosowanie AE do skór natychmiast po ekspozycji na UVB lub przed ekspozycją na UV również znacząco obniżyło poziom 8-OH-dG (Figura 5a). Figura 5 (a) Wpływ AE na tworzenie 8-OH-dG. Skrawki skóry od myszy traktowanych AE po ekspozycji lub przed ekspozycją na UVB analizowano na poziomy 8-OH-dG, jak opisano w Metodach. (b) Wpływ AE na ekspresję NQO1 w skórze myszy
[przypisy: odżywki na mase mięśniową, glykopeel, chomik syryjski ile żyje ]
[hasła pokrewne: glykopeel, poliploidalność, młody jęczmień green ways ]