Skip to content

Indukcja regulatora sygnału cytokin SOCS3 / CIS3 jako strategia terapeutyczna w leczeniu zapalenia stawów ad 6

2 miesiące ago

324 words

Stawkę kostną myszy nieleczonej użyto jako normalnej kontroli (ścieżka 1). Przeprowadzono analizę RT-PCR w celu wykrycia poziomów TNF-a, IL-ip, IL-6 i IL-10. Terapia genowa CIS3 hamuje CIA. Aby dodatkowo ocenić efekt terapeutyczny adenowirusów CIS3 i dnSTAT3 w RA, zastosowaliśmy adenowirusy do CIA. Osiem tygodni myszy DBA / 1J immunizowano kolagenem bydlęcym typu II emulgowanym w kompletnym adiuwancie. Po 21 dniach myszy otrzymały dawkę przypominającą z użyciem tej samej ilości kolagenu w niekompletnym adiuwancie i obserwowano patologię choroby rozpoczynającą się 28 dni po immunizacji. Aby zsynchronizować początek zapalenia stawów, LPS wstrzyknięto dootrzewnowo w 28 dniu (26, 27). Po pierwsze, w celu zbadania terapeutycznych efektów przenoszenia CIS3 i genu dnSTAT3 w CIA, AxCACIS3 lub AxCAdnSTAT3 podawano przez wstrzyknięcie okołostawowe do stawów nadgarstka i kostki myszy w 28 dniu po pierwszej immunizacji (Figura 5, a (cc). Ciężkość artretyzmu (Figura 5, a. C), grubość łapy i zaczerwienienie (Figura 5b) były znacznie zmniejszone w grupie zakażonej przez AxCACIS3, w porównaniu z grupą leczoną przez AxCALacZ. Przeciwnie, miejscowe okołostawowe przenoszenie genów dnSTAT3 było również skuteczne, ale nie całkowicie zmniejszało nasilenie zapalenia stawów, grubości łapy i zaczerwienienia w porównaniu z adenowirusem CIS3 (Figura 5, a (cc). Oceniliśmy pogrubienie tkanki maziowej, naciek komórek jednojądrzastych oraz zniszczenie chrząstki i kości przez inwazję łuszczki z badaniem histopatologicznym (Figura 5c). Każda mysz wykazywała znacznie łagodniejszą patologię w stawie leczonym przez AxCACIS3 niż w połączeniu leczonym AxCALacZ. Stawy myszy leczonych AxCACIS3 wykazywały znacznie mniejszą zapalną tkankę stawową i silną redukcję erozji kości i liczbę komórek zapalnych (Figura 5c). AxCAdnSTAT3 również zmniejszył patologiczne zniszczenie chrząstki i kości, ale nie był tak skuteczny jak AxCACIS3. Pomiar grubości chrząstki wykazał, że chrząstka była dobrze zachowana w stawach leczonych przez AxCACIS3. Porównanie klas histologicznych i grubości chrząstki między dwiema grupami wykazało, że różnice były statystycznie istotne (P <0,01). Następnie zbadaliśmy, czy adenowirus był również skuteczny po ustaleniu choroby. Adenowirusy podawano przez wstrzyknięcie okołostawowe do stawów nadgarstkowych i kostkowych myszy 4 dni po wstrzyknięciu LPS (Figura 6). Adenowirus CIS3 silnie blokował rozwój choroby przez 20 dni po wstrzyknięciu wirusa, co oceniono na podstawie badania klinicznego, grubości łapy i zaczerwienienia. Badanie histologiczne potwierdziło również efekt terapeutyczny adenowirusa CIS3 (dane nie pokazane). Natomiast efekt adenowirusa dnSTAT3 był przejściowy (Figura 6); hamował rozwój zapalenia stawów przez 10 dni, ale później pojawiły się objawy artretyzmu. Wyniki te sugerują, że lokalna ekspresja CIS3 po przeniesieniu genu do stawów z ustaloną chorobą może skutecznie chronić tkankę przed zapaleniem i blokować erozję kości. Dyskusja Celem tego badania było poszerzenie naszej wiedzy na temat roli odgrywanej przez STAT3 i regulator negatywny sygnalizujący cytokiny, CIS3, w patogenezie różnych chorób artretycznych poprzez zakłócanie szlaków sygnałowych cytokin. Nasze badanie miało również na celu opracowanie nowej strategii terapeutycznej w leczeniu RA przez blokowanie wewnątrzkomórkowych szlaków sygnałowych cytokin. Opisaliśmy wcześniej hiperaktywację indukcji STAT3 i CIS3 w zapalnych chorobach jelit (IBD) i mysich modelach IBD (17). Wykazaliśmy, że IL-6 odgrywa kluczową rolę w rozwoju zapalenia okrężnicy i że aktywacja STAT3 jest zaangażowana w utrwalanie zapalenia okrężnicy. Stwierdziliśmy również, że CIS3 indukowano rozwojem zapalenia okrężnicy, podczas gdy w przeciwieństwie do ekspresji CIS3 wysokiego poziomu tłumiono aktywację STAT3. Wymuszona ekspresja dominującej negatywnej postaci CIS3 u myszy spowodowała cięższe zapalenie okrężnicy. W związku z tym zaproponowaliśmy, że ekspresja CIS3 negatywnie reguluje patogenezę stanu zapalnego przez modulowanie aktywności STAT3 w zapaleniu okrężnicy. Podobnie obserwowaliśmy hiperaktywację ekspresji STAT3 i CIS3 u chorych na RZS i zwierzęcych modeli RZS. Dlatego proponujemy tutaj, że hiperaktywacja STAT3 wiąże się z progresją i / lub rozwojem RA, a indukcja CIS3 hamuje stan zapalny przez redukcję aktywności STAT3. Ponieważ indukowano ekspresję CIS3 po aktywacji STAT3 (Figura 1, b i c), CIS3 prawdopodobnie działa jako regulator sprzężenia zwrotnego STAT3 o ujemnym sprzężeniu zwrotnym. Jest możliwe, że ekspresja CIS3 jest jednym, jeśli nie jedynym, mechanizmem, który negatywnie reguluje reakcję zapalną w zapaleniu stawów [więcej w: fundacja stwardnienie rozsiane, glykopeel, sennik pocałunek w policzek ] [więcej w: sennik pocałunek w policzek, zapalenie woreczka łzowego, glykopeel ]