Skip to content

Komórki T CD4 + swoiste dla kłębuszkowego antygenu błony podstawnej pośredniczą w kłębuszkowym zapaleniu nerek czesc 4

2 tygodnie ago

823 words

Przedstawiono działania AB dla rCol4a3NC1 w supernatantach z linii komórkowej T Col4a 3NC1, określone przez analizę Western blot (wstawka). Fenotyp cytokin linii komórek T po trzeciej stymulacji charakteryzował się wewnątrzkomórkowym barwieniem cytokiny. Fenotyp cytokin najpierw oznaczono metodą RT-PCR po stymulacji rCol4a3NC1. Tylko IFN-y mRNA wykryto w linii komórek T specyficznych dla rCol4a 3NC1 po stymulacji (Figura 3a). Jak pokazano na Figurze 3b, populacja komórek T, która wydzielała IFN-y, ale nie IL-4, została wykryta w liniach komórek T po aktywacji przez mitogeny, wskazując fenotyp Th1. Figura 3 Profile cytokinowe w linii komórkowej T specyficznej dla rCol4a 3NC1. (a) Wykrywanie RT-PCR ekspresji INF-a / IL-4 szczura w spoczynku (R) lub po stymulacji rCol4a3NC1 (S). Znaczniki wielkości DNA są pokazane po lewej stronie. (b) Analizy cytometrii przepływowej na komórkach linii komórek T specyficznych dla Col4a 3NC1 w spoczynku (lewy panel) lub stymulowane mitogenami (prawy panel) po wewnątrzkomórkowym wybarwieniu anty-szczurzy IFN-y. i Ab. IL-4. Przeniesienie komórek T CD4 + swoistych dla rCol4 . 3NC1 indukuje białkomocz i GN u naiwnych biorców. Trzy charakterystyczne specyficzne dla rCol4a 3NC1, linie komórek T CD4 + typu Th1 przeniesiono do 11 syngenicznych szczurów, które otrzymały toksynę krztuścową 24 godziny wcześniej. Łagodne białkomocz stał się wykrywalny u biorców komórek T około 10 do 12 dni po transferze komórek. Dwa z 11 powróciły do normalności bez dalszego rozwoju, podczas gdy w pozostałych dziewięciu białkomocz utrzymywała się i stopniowo osiągała plateau, w zakresie od 1100 do ponad 2500 mg / dl w ciągu dnia od 35 do 40 (Figura 4a). Analizy SDS-PAGE próbek moczu wykazały ciężką albuminurię (Figura 4b). Białkomocz towarzyszył ciężki krwiomocz. Ciężkie białkomocz / albuminuria wskazały na uszkodzenie kłębuszków u biorców komórek T. Jednak rozwój białkomoczu / krwiomoczu u biorców komórek T był znacznie wolniejszy w porównaniu ze szczurami aktywnie immunizowanymi rCol4a3NC1, w których białkomocz szybko ustąpił plateau około 24 dni po immunizacji (24). Żaden z biorców komórek T nie zginął podczas okresu doświadczalnego, w porównaniu z 30% umieralności u szczurów immunizowanych rCol4a 3NC1 około 35 dni (24). Figura 4 Białkomocz i rozwój albuminurii u biorców komórek T swoistych dla rCol4a 3NC1. (a) Próbki moczu zebrano jak wskazano (oś x) u 11 biorców komórek T i zmierzono białkomocz (oś y). Wypełnione symbole, szczury o surowym GN; otwarte symbole, skromny GN; przerywane linie, normalna nerka. (b) Próbki moczu od reprezentatywnego biorcy komórki T (komórki T) z ciężkim GN i szczurem immunizowanym rCol4a3NC1 (rCol) analizowano za pomocą SDS-PAGE. Strzałki po prawej stronie oznaczają albuminy surowicy. Szczury uśmiercono około 65 dni po przeniesieniu komórek T. Nerki od pięciu szczurów z białkomoczem powyżej 1500 mg / dl pojawiły się blade i powiększone, natomiast nerki z pozostałych sześciu miały normalny rozmiar i kolor. Histopatologia tkanek nerek wykazała podobne uszkodzenie kłębuszków, jak obserwowano u szczurów immunizowanych rCol4a 3NC1 (24) (Figura 5a). Nasilenie GN było skorelowane z ilością białkomoczu i nienormalnym wyglądem. Pięć nerek z nieprawidłowym wyglądem wykazało ciężką postać GN (50-65% kłębuszków z formacją półksiężycową). W przeciwieństwie do tego, nerki z czterech szczurów z białkomoczem poniżej 1500 mg / dl miały skromne GN, w którym formacja półksiężycowa wpływała na mniej niż 25% kłębuszków. Nerki z dwóch bez znacznego białkomoczu nie miały oznak GN. W ciężkim i skromnym GN, kłębuszki z półksiężycami, a także niektóre z nich, wykazały odcinkowe odkładanie się fibryny i martwicę. Barwienie Jonesa wykazało odkładanie się białek matrycowych wokół kłębuszków i nieregularnych, zagęszczonych GBM (dane nie są pokazane). Badania w mikroskopie elektronowym (EM) szczególnie ujawniły znaczną utratę procesów podocytów (Figura 6). Badanie innych narządów (z wyjątkiem płuca, który jest obecnie oceniany patologicznie) u dwóch biorców komórek T z ciężkim GN nie wykazało zmian patologicznych. Jako kontrolę, komórki T wyizolowane od immunizowanych CFA szczurów stymulowano Con-A lub PPD. Przeniesienie tych komórek T nie spowodowało żadnych zmian patologicznych ani białkomoczu u sześciu szczurów. Czasami stwierdzono, że skupiska komórek T otaczają naczynia krwionośne. Doszliśmy do wniosku, że przeniesienie komórek T specyficznych dla Col4a 3NC1 indukowało GN w syngenicznych naiwnych biorcach. Figura 5 Rozbudowa GN w biorcach komórek T swoistych dla rCol4a 3NC1. (a) Histologia pokazuje kłębuszek z odkładaniem fibryny i formowaniem półksiężyca. W sąsiedztwie kłębuszka znajduje się naciek jednojądrzasty. Ogniskowe są rozszerzone i zawierają intensywnie eozynofilowy materiał zgodny z białkiem
[hasła pokrewne: fundacja stwardnienie rozsiane, fit med salon, odżywki na mase mięśniową ]
[hasła pokrewne: niedobór witaminy d u dorosłych objawy, leczenie kanałowe białystok, obliczanie zdolności kredytowej ]