Skip to content

Komórki tuczne odgrywają kluczową rolę w rekrutacji neutrofili w eksperymentalnym pemfigoidzie pęcherzykowym czesc 4

4 tygodnie ago

593 words

MC u zwierząt kontrolnych (b) ma pewną liczbę dużych granulek cytoplazmatycznych, które pojawiają się w różnej gęstości, podczas gdy inne MC od patogennego zwierzęcia z iniekcją IgG (c) przedstawia wiele pustych wakuoli, które najwyraźniej wynikały z degranulacji. Liczne mikrokosmki obserwuje się w błonie komórkowej zdegranulowanych MC, co wskazuje na status aktywowanej komórki. (d) MC w skórze właściwej zliczono i sklasyfikowano jako degranulowane (> 10% granulek wykazujących fuzję lub rozładowanie) lub normalne (patrz Metody). Degranulacja MC osiągnęła najwyższy poziom w 1-2 godz. Po patogennym wstrzyknięciu IgG. (e) Dane dotyczące aktywności MPO skóry (średnia . SEM) ujawniają początek infiltracji PMN w 2 godziny po wstrzyknięciu IgG (n = 5 dla każdej z przedstawionych grup). Myszy z niedoborem MC są oporne na eksperymentalne BP. Aby określić, czy MC biorą udział w doświadczalnym BP, wstrzyknęliśmy myszom z niedoborem MC i patogennym IgG. Myszy MC + / + (n = 8) wykazywały degranulację MC poprzez barwienie błękitem toluidynowym oraz rozwinięte blistry histologiczne i kliniczne 12 godzin po wstrzyknięciu IgG (Figura 2, a i d). Przeciwnie, myszy MGF z niedoborem MC / MgfSl-d (n = 8), którym wstrzyknięto patogenną IgG, nie miały klinicznych lub histologicznych objawów tworzenia pęcherzy (Figura 2, e i h), pomimo faktu, że te zwierzęta wykazywały tak duże osadzanie się IgG i C3 w BMZ, podobnie jak myszy typu dzikiego (Figura 2, b, c, f oraz g). Badanie histologiczne nie wykazało obecności pęcherzyków podnaskórkowych ani obecności MC w skórze (ryc. 2h). Podobny fenotyp stwierdzono u myszy Kitw / Kitw-v z niedoborem MC, po wstrzyknięciu patogennej IgG (Tabela 1). Biorąc pod uwagę, że oba szczepy myszy z niedoborem MC spowodowane przez odrębne mechanizmy są oporne na eksperymentalne BP, wyniki te silnie sugerują, że MC odgrywają istotną rolę w BP. Figura 2 Analiza kliniczna i immunohistologiczna u nowonarodzonych myszy z niedoborem MC i niewystarczających, którym wstrzyknięto patogenne IgG anty-mBP180. IgG anty-mBP180 (masa ciała 2,5 mg / g) wywoływała rozległą chorobę pęcherzową u myszy z wystarczającą liczbą MC (+ / +) (a). Skóra tych zwierząt wykazywała liniowe odkładanie króliczych IgG (b) i mysich C3 (c) w BMZ, jak określono za pomocą bezpośredniego IF. Barwienie błękitem toluidynowym ujawniło separację naskórkowo-skórną z degranulacją MC (d). Przeciwnie, myszy z niedoborem MC (MgfSl / MgfSl-d) wstrzyknięte śródskórnie patogennym IgG nie wykazały żadnych objawów choroby skóry (e). Direct IF wykazał odkładanie BMZ króliczych IgG (f) i mysich C3 (g). Barwienie błękitem toluidynowym nie wykazało rozdzielenia naskórkowo-skórnego i nieobecności MC (h). d, skóra właściwa; e, naskórek; v, pęcherzyk; czarna strzałka a i e, miejsce blisteru klinicznego; biała strzałka, miejsce znakowania przeciwciał; czarna strzałka w d i h, strona BMZ. × 400. Wstawienie w d jest mikrografem o mniejszym powiększeniu pokazującym krawędź podnaskórkowego pęcherzyka. × 100. Tabela Rola MC w tworzeniu blistra BP Rekonstytucja MC w skórze przywraca BP u myszy z niedoborem MC. Aby bezpośrednio wykazać zapotrzebowanie na MC w podepidermalnych pęcherzykach w doświadczalnym BP, wstrzyknęliśmy patogenną IgG myszom Kitw / Kitw-v (n = 6) miejscowo naprawionym z ich niedoborem MC przez adoptywne przeniesienie hodowanych MC pochodzących z kongenicznej kości myszy MC + / + komórki szpiku. MC, infiltrujące neutrofile i pęcherze podnaskórkowe znaleziono w rekonstytuowanych prawych uszach MC, ale nie w lewych uszach pozbawionych MC (Figura 3 i Tabela 1). Wzrost liczby neutrofilów w rekonstytuowanym miejscu MC był istotnie wyższy niż w miejscu z niedoborem MC (P <0,01). Wyniki te wyraźnie pokazują, że infiltracja neutrofili i późniejsze tworzenie się pęcherzyków wyzwalane przez IgG anty-BP180 rzeczywiście zależą od MC. Dane odtwarzające MC również wykluczają możliwość, że oporność myszy z niedoborem MC na eksperymentalne BP wynika z innych niezidentyfikowanych defektów wynikających z mutacji c-Kit u myszy Kitw / Kitw-v, poza niedoborem MC tych zwierząt. Figura 3 Wpływ rekonstytucji MC na naciek neutrofili i późniejsze pęcherze podnabłonkowe u myszy z niedoborem MC z niedoborem MC, którym wstrzyknięto IgG anty-BP180. Infiltrację neutrofilów i tworzenie pęcherzy oznaczano po lewej stronie (niedobór MC) (środkowy słupek) i prawym (rekonstytuowany MC) (dolny słupek) uszy myszy Kitw / Kitw-v poddanych miejscowej rekonstrukcji prawego ucha x 106 MC + / + MCs pochodzące ze szpiku kostnego 10 tygodni przed patogennym wstrzyknięciem IgG (2 mg / ucho). Miotom MC + / + (górny słupek) wstrzyknięto również tę samą dawkę IgG do ucha jako kontrolę pozytywną (patrz Metody dla szczegółów). Znacznie podwyższone poziomy aktywności MPO (średnia . SEM) obserwowano w prawym uchu w porównaniu z lewym uchem myszy Kitw / Kitw-v [podobne: zapalenie woreczka łzowego, odżywki na mase mięśniową, fit med ] [hasła pokrewne: odżywki na mase mięśniową, jęczmień green ways, kotlety mielone bez jajka ]