Skip to content

Komórki tuczne odgrywają kluczową rolę w rekrutacji neutrofili w eksperymentalnym pemfigoidzie pęcherzykowym

4 tygodnie ago

713 words

Pemfigoid pęcherzowy (BP) jest zapalną podnaskórkową chorobą pęcherzykową związaną z autoimmunologiczną odpowiedzią IgG na hemidesmosomalne białko BP180. Pasywne przenoszenie przeciwciał na mysią ektodomenę BP180 (mBP180) wywołuje pęcherzową chorobę skóry u myszy, która zależy od aktywacji dopełniacza i nacieku neutrofili i ściśle naśladuje ludzki BP. W niniejszym badaniu wykazaliśmy, że komórki tuczne (MC) odgrywają kluczową rolę w doświadczalnym BP. Myszy typu dzikiego wstrzyknięte śródskórnie patogennym IgG anty-mBP180 wykazywały rozległe degranulacje MC w skórze, które poprzedzały infiltrację neutrofili i późniejsze pęcherze podnabłonkowe. Przeciwnie, myszy z niedoborem genetycznym myszy MC lub myszy o wystarczającej liczbie MC, które wcześniej poddano działaniu inhibitora degranulacji MC, nie rozwijały BP. Ponadto myszy z niedoborem MC, odtworzone na skórze z MC, stały się podatne na eksperymentalne BP. Pomimo aktywacji dopełniacza w celu uzyskania C3a i C5a, w nieobecności MC, nagromadzenie neutrofilów w miejscu wstrzyknięcia było stępione. Brak odpowiedzi z powodu niedoboru MC został przezwyciężony przez śródskórne podanie chemotaktycznego neutrofila, IL-8 lub przez rekonstytucję miejsc wstrzyknięcia neutrofilami. Odkrycia te dostarczają pierwszych bezpośrednich dowodów na naszą wiedzę, że MC odgrywają zasadniczą rolę w rekrutacji neutrofili podczas tworzenia pęcherzyków podnaskórkowych w doświadczalnym BP. Wprowadzenie Pemfigoid pęcherzowy (BP) jest nabytą chorobą autoimmunologiczną skóry charakteryzującą się autoprzeciwciałami przeciwko dwóm antygenom hemidesmosomalnym, BP230 (BPAG1) i BP180 (BPAG2) oraz pęcherzami podnaskórkowymi (1). Te autoprzeciwciała przeciwnukleoidowe można wykryć wraz z białkami dopełniacza, związanymi ze złączem skórno-naskórkowym (DEJ) skóry okołogałowej. W zmianach skórnych u tych pacjentów podstawowe keratynocyty odrywają się od leżącej poniżej skóry właściwej na poziomie blaszki liściowej, prowadząc do podnaskórkowego tworzenia pęcherzy (1, 2). Eozynofile (3, 4), neutrofile (5), limfocyty (6), monocyty / makrofagi (7, 8) i komórki tuczne (MC 7; 9) są obecne w górnej skórze obszarów uszkodzenia u pacjentów z BP. Co ciekawe, degranulacja MC jest cechą BP (7, 9). Chemoataktyty z MC, w tym czynniki chemotaktyczne eozynofilowe / neutrofilowe i histamina, występują w dużych stężeniach w płynach pęcherzowych BP (10, 11). Podobne zmiany skórne obserwuje się w zaburzeniu niewirusowym związanym z ciążą, herpes ciąża (12). Obserwacje te sugerują, że MC mogą odgrywać rolę w tworzeniu pęcherzy. Zastosowaliśmy eksperymentalny model BP, który obejmuje pasywny transfer przeciwciał anty-mBP180 do nowonarodzonych myszy BALB / c w celu odtworzenia kluczowych immunopatologicznych cech tej ludzkiej choroby autoimmunologicznej: IgG i odkładanie się dopełniacza w DEJ, naciek zapalny w górnej skórze właściwej i podnaskórkowe pęcherzenie (13). Patogeniczność przeciwciał anty-mBP180 zależy od aktywacji dopełniacza (14) i rekrutacji leukocytów polimorfojądrowych (PM) (15). W niniejszym badaniu zbadaliśmy rolę MC w doświadczalnym BP przy użyciu myszy genetycznie niedoborowych w MC. Metody Zwierzęta laboratoryjne. Pary hodowlane z niedoborem MC WCB6F1-MgfSl / MgfSl-d (określane jako MgfSl / MgfSl-d), z niedoborem MC WBB6F1-Kitw / Kitw-v (określane jako Kitw / Kitw-v) i z congenic MC- wystarczający (MC + / +) mioty z miotu (16) i B10-D2-OSN z niedoborem C5 (C5a) i ich dopasowane normalne myszy kontrolne B10-D2-NSN (C5 +) zakupiono w The Jackson Laboratory (Bar Harbor, Maine, USA). ) i utrzymywany w Medical College of Wisconsin Animal Resource Center oraz University of North Carolina w ośrodku Chapel Hill Animal. Niedobór MC w myszach MgfSl / MgfSl-d i Kitw / Kitw-v jest powodowany przez odrębne mutacje odpowiednio w czynniku wzrostu MC i c-Kit (16). Nowonarodzone myszy (24. 36 godzin, 1,4. 1,6 g) stosowano do eksperymentów przenoszenia pasywnego. Przygotowanie patogennej króliczej anty-mysiej IgG. Przygotowanie rekombinowanego mBP180 i immunizację królików przeprowadzono jak opisano wcześniej (13). Miana króliczych przeciwciał anty-mBP180 w surowicach królika i oczyszczonych frakcjach IgG badano za pomocą pośredniej immunofluorescencji (IF) z użyciem kriosekcji skóry myszy jako substratu (13). Patogeniczność tych preparatów IgG zbadano w doświadczeniach z przeniesieniem pasywnym, jak opisano poniżej. Indukcja eksperymentalnej BP i ocena zwierząt. Próbkę jałowej myszy podawano w dawce 50 .l sterylnej IgG w PBS przez śródskórną iniekcję (2,5 mg IgG na gram masy ciała), jak opisano wcześniej (13, 15). Skórę noworodków myszy z grup testowych i kontrolnych badano 12 godzin po wstrzyknięciu IgG
[patrz też: przepisy w diecie dukana, pocałunek w policzek sennik, chomik syryjski ile żyje ]
[przypisy: podkład match perfection, pocałunek w policzek sennik, fitomed krem nawilżający tradycyjny ]