Skip to content

Reostat translacyjny dla RFLAT-1 reguluje ekspresję RANTES w limfocytach T ad 7

1 miesiąc ago

909 words

Drugorzędowa struktura RFLAT-1 5 (3 -UTR wydaje się być ważna głównie w testach translacji in vitro, podczas gdy in vivo większość translacyjnego hamowania może być przypisana do uAUG w sekwencji. Ta obserwacja nie wyklucza roli rozległej struktury drugorzędowej w represji translacji w komórce. Wielokrotne wewnętrzne spinki do włosów mogą być ważne dla ułatwienia hamującego działania uAUGs przez promowanie pozycjonowania rybosomów w tych miejscach. W tym czasie nie można wykluczyć roli białek wiążących RNA w represji translacji RFLAT-1. Niemniej jednak, jest prawdopodobne, że ogólna maszyneria translacyjna jest odpowiedzialna za regulację ekspresji RFLAT-1, ponieważ różne transkrypty mają różne wymagania dla czynników translacji, a zatem mogą być regulowane w sposób specyficzny dla genu (47, 48). Tłumaczenie wyrażenia RFLAT-1 jest zależne od czapki. eIF4E jest czynnikiem ograniczającym szybkość w inicjacji translacji (32, 33), a nadekspresja eIF4E może złagodzić represyjną translację wiadomości z wysoce strukturalnymi 5 -UTR (35, 36). Pokazujemy tutaj, że nadekspresja eIF4E powoduje wyższy poziom białka RFLAT-1 przetłumaczonego z komunikatu o pełnej długości, ale nie z mRNA pozbawionego 5 -UTR, co wskazuje, że translacja RFLAT-1 jest zależna od czapeczki. Ponadto poziomy białka eIF4E wzrastają podczas późnej aktywacji limfocytów T w połączeniu z pojawieniem się RFLAT-1, wspierając rolę podstawowej maszyny translacyjnej w regulowaniu ekspresji RFLAT-1. Aktywność eIF4E jest regulowana na wielu poziomach, w tym interakcja z białkami inhibitorowymi (4E-BP) i fosforylacja. Fosforylacja 4E-BP, która powoduje aktywację eIF4E, odbywa się za pośrednictwem szlaku zależnego od PI-3Ka i jest hamowana przez rapamycynę immunosupresyjną. Traktowanie PBL rapamycyną spowodowało zmniejszenie produkcji RFLAT-1, co dodatkowo implikuje eIF4E w regulacji ekspresji RFLAT-1. Kinaza eIF4E Mnk1 jest kontrolowana zarówno przez szlaki transfekcji sygnału p38 MAPK, jak i ERK-1/2 (41). Poziomy RFLAT-1 były obniżone w PBL potraktowanych inhibitorami obu ścieżek, co sugeruje, że Mnk1 jest zaangażowany w regulację translacji RFLAT-1. Ekspresja konstytutywnie aktywnego mutanta Mnk1 zwiększała poziomy białka RFLAT-1, podczas gdy dominujący negatywny mutant Mnk1 hamował ekspresję RFLAT-1. Wyniki te wskazują, że Mnk1 działa jako pozytywny regulator ekspresji RFLAT-1, prawdopodobnie poprzez fosforylację eIF4E i promowanie inicjacji translacji. Podsumowując, dane te potwierdzają naszą konkluzję, że regulacja tłumaczenia RFLAT-1 jest zależna od czapki. Translacyjny reostat do ekspresji RFLAT-1 / RANTES. Regulacja translacyjna jest szczególnie ważna podczas wzrostu i różnicowania komórek (22, 25). Przykłady regulacji translacyjnej w układzie odpornościowym zostały ostatnio opisane. Raport, że IFN-y Ekspresja mRNA jest regulowana przez PKR (49) sugeruje, że poziomy efektorowego mRNA w różnych komórkach odpornościowych mogą być regulowane przez różne mechanizmy. Kontrola translacyjna umożliwia komórkom szybkie reagowanie na zmiany w środowisku bez syntezy de novo lub degradacji określonych mRNA. Ponieważ funkcja eIF4E może być regulowana przez wiele fizjologicznych bodźców, w tym czynniki wzrostu, mitogeny i cytokiny (22), można sobie wyobrazić, że ekspresja RFLAT-1, a zatem RANTES, może podlegać dynamicznej regulacji w limfocytach T. Zmiany stanu obfitości i / lub fosforylacji eIF4E lub 4E-BP w odpowiedzi na te bodźce mogą modulować hamujący efekt 5 -UTR. Zgodnie z tą ideą obserwujemy, że IL-2 może regulować ekspresję RFLAT-1 i RANTES poprzez wzmocnioną ekspresję i fosforylację białka eIF4E. Oprócz eIF4E kompleks inicjujący eIF4F składa się z innych czynników, w tym eIF4A (zależna od RNA ATPaza i helikaza) i białka szkieletowego eIF4G, które zawiera miejsca wiązania dla eIF4E, eIF4A, eIF3, Mnk1 i wiązania poliA białko (23). Tak więc, translacja RFLAT-1 może być również modulowana przez regulację innych składników kompleksu inicjacji translacji. Na przykład, zmiany w aktywności helikazy RNA eIF4A mogą być możliwym celem regulacji, zważywszy na wysoce uporządkowaną 5-JUTR RFLAT-1. Translacyjna regulacja RANTES może być krytyczna in vivo w miejscach zapalenia. Komórki odpornościowe wykorzystują niezliczoną ilość receptorów, aby stale monitorować swoje otoczenie, gdy przemieszczają się przez przestrzenie pozakomórkowe do miejsc urazu w celu podżegania i utrzymania stanu zapalnego. W tym kontekście. Późno. (3. 5 dni po aktywacji) ekspresja RANTES w limfocytach T jest szczególnie interesująca, co sugeruje, że ta chemokina może odgrywać szczególną rolę w regulacji stanu zapalnego zależnego od limfocytów T w czasie i przestrzeni Tutaj pokazujemy, że translacyjna regulacja ekspresji RANTES umożliwia szybką odpowiedź na cytokiny i czynniki wzrostu (tj. IL-2) w dojrzałych efektorowych komórkach T. Subtelne zmiany w gradientach chemokin zapewniają precyzyjny reostat do chemoattractji i zdarzenia związane z aktywacją komórek immunologicznych. Podziękowania Dziękujemy Shu-Chen Lyu, Xiaoli Qin i Kianoush Khaleghpour za pomoc techniczną oraz Peterowi Sarnowowi za hojne udostępnienie swojego sprzętu laboratoryjnego. Prace te były wspierane przez dotację NIH DK-35008, a po części przez dotację PF-77419 z Fundacji Pomocy Dzieciom im. Elizabeth Glaser i Ośrodków Dializy Satelitarnej Young Investigator Grant of National Kidney Foundation. Footnotes Obecny adres Tania Nikolcheva to: IVDU, Roche Bioscience, Palo Alto, Kalifornia, USA. Obecny adres Stephane Pyronnet to: INSERM U531, Institut Louis Bugnard, Tuluza, Francja. Konflikt interesów: nie zgłoszono konfliktu interesów. Zastosowano niestandardowe skróty: czynnik RANTES późnych aktywowanych limfocytów T-1 (RFLAT-1); białko zapalne makrofagów 1. (MIP-1.); Czynnik podobny do Krüppela 13 (KLF13); podstawowe białko wiążące element transkrypcji (BTEB); nieprzetłumaczone regiony (UTR); otwarte ramki odczytu (uORF); upstream AUGs (uAUGs); fitohemaglutynę-P (PHA-P); lucyferaza (Luc).
[więcej w: chomik syryjski ile żyje, młody jęczmień green ways, odżywki na mase mięśniową ]
[więcej w: sennik sutek, dieta dukana przepisy faza 1, atopowe zapalenie skory zdjecia ]