Skip to content

Wpływ wdychanego tlenku azotu na regionalny przepływ krwi jest zgodny z wewnątrznaczyniowym dostarczaniem utlenionej azotowej cd

2 miesiące ago

500 words

Ilość hemoglobiny nitrozylowej (hemowej) jest zatem różnicą w ilości całkowitej SNO-Hb i hemoglobiny nitrozylowej (hemowej), oznaczoną bez wstępnej obróbki KCN / K3FeIII (CN) 6, a SNO-Hb określoną za pomocą KCN / K3FeIII (CN) 6 wstępna obróbka. Wartość ta została podzielona przez stężenie hemoglobiny, a całkowita wartość wyrażona jako stężenie w pełnej krwi. Chemiluminescencyjne oznaczanie azotanu w surowicy, azotyny oraz S-nitrozotioli o wysokiej i niskiej masie cząsteczkowej na bazie ozonów. Próbki krwi pobierano do probówek do pobierania EDTA i odwirowywano przy 750 g przez 5 minut. Porcje osocza usunięto i przechowywano w temperaturze ~ 80 ° C, aż do oznaczenia azotanów, azotynów i S-nitrozotioli o niskiej masie cząsteczkowej (LMW-SNO). Te próbki osocza później rozmrożono, rozcieńczono 1: 2 w 0,5 mM EDTA wody i przesączono przez przemyte wstępnie (czterokrotnie wodą wolną od azotynów) 30000 jednostek odcinających o ciężarze cząsteczkowym. Próbki następnie wstrzykiwano w różne reduktory w linii z analizatorem Sievers Model 280 NO. Azotyn mierzono przez redukcję zakwaszonego KI (7 ml lodowatego kwasu octowego, 2 ml wody destylowanej, 50 mg KI) (23). Azotan mierzono przez redukcję wanadu (III) w 90 ° C (24). LMW-SNO mierzono w Cu + / L-cysteina, która nie uwalnia NO z azotanu lub azotynów (25). Występuje około 25% utrata LMW-SNO w osoczu w ciągu 30 minut, nawet w obecności 0,5 mM EDTA, co daje zmierzoną granicę wrażliwości testu chemiluminescencyjnego Cu + / L-cysteina. Dla S-nitrotioli w osoczu. 25 nM. (Ponieważ LMW-SNO nie był wykrywalny w naszym teście, możemy wywnioskować, że poziomy LMW-SNO w ludzkim osoczu są mniejsze niż 25 nM.) Ponieważ wysokocząsteczkowe S-nitrozotiole (HMW-SNO) są niestabilne w osoczu , natychmiast przeanalizowaliśmy plazmę dla tego gatunku NO. 500-. L porcję niezamarzniętego osocza przeprowadzono na kolumnie o wielkości 9,5 ml objętościowej Sephadex G25 w ciemnym pomieszczeniu w ciągu 30 minut od pobrania próbki. Mierzono objętość elucyjną od 3 do 3,5 ml zawierającą białka osocza o dużej masie cząsteczkowej (albumina i immunoglobuliny), a w reakcji l3. Poddano reakcji 200. L. Wstrzyknięcie próbek do tego I3. reduktant wytwarza stechiometrycznie NO z nitrozotioli (21, 23). Analiza statystyczna. Obliczenie wielkości próbki a priori wykazało, że 16 osób byłoby konieczne do wykrycia 25% poprawy przepływu krwi w przedramieniu podczas inhalacji NO, gdy synteza NO przedramienia została zahamowana przez L-NMMA w porównaniu z wartościami powietrza w pomieszczeniu (alfa = 0,05 , moc = 0,80). Dwustronne wartości P obliczono za pomocą sparowanego testu t dla porównań parami pomiędzy wartościami początkowymi a wartościami L-NMMA w infuzji, pomiędzy wartością wyjściową a wartościami wysiłku oraz między wartościami zmierzonymi powietrzem z pomieszczenia i NO w porównywalnych punktach czasowych badania. Pomiary powtórzeń ANOVA wykonano dla gradientów tętnic na żyły NO podczas podstawowego infuzji L-NMMA i warunków wysiłkowych. Pokazane pomiary są średnie. SEM. Wyniki Hemodynamika przedramienia. Wlew L-NMMA podczas oddychania w pomieszczeniu znacznie zmniejszał przepływ krwi przedramienia (ryc. 1a i ryc. 2a) oraz zwiększał opór naczyniowy przedramienia (ryc. 1b i ryc. 2b) od wartości wyjściowych (obie P <0,001). Ta odpowiedź zwężająca naczynia w stosunku do L-NMMA wiązała się ze znacznym wzrostem gradientu ciśnienia parcjalnego w tętnicy przedniej na linii żylnej tlenu (pO2) (od 59. 4 do 64. 4 mmHg; P = 0,044) i pH tętnicy do żyły gradient (od 0,029. 0,008 do 0,051. 0,010 jednostek; P = 0,031) w wyniku zmniejszenia ilości żylnego pO2 (od 41. 4 do 35. 3 mmHg; P = 0,014) i pH (od 7,353. 0,008 do 7,338. 0,008 jednostek; P = 0,084) poziomów od linii bazowej (Figura 3). Po 5 minutach powtarzalnego ćwiczenia ręcznego podczas ciągłego wlewu L-NMMA, przepływ krwi wzrósł prawie ośmiokrotnie (Figura 1a i Figura 2c), a oporność zmniejszyła się (Figura 1b i Figura 2d) od wartości początkowej (obie P <0,001). Ta odpowiedź była związana z dalszym poszerzaniem gradientu pO2 w tętnicy do żyły (do 79. 2 mmHg; P <0,001) i gradientem pH (do 0,124. 0,012 jednostek; P <0,001) względem wartości wyjściowych z powodu znacznego zmniejszenia w żylnym pO2. (do 24 1 mmHg; P <0,001) i wartości pH (do 7,633 0. 0,011 jednostek; p <0,001) podczas ćwiczeń (ryc. 3). Figura 1Przepływ krwi z układu nerwowego (a) i opór naczyniowy (b) na początku i podczas infuzji tętniczej L-NMMA (w celu zahamowania syntezy NO przedramienia), a następnie ćwiczenia przedramienia. Początkowe pomiary przeprowadzono na powietrzu w pomieszczeniu, a następnie powtórzono podczas NIE oddychania przy 80 ppm. Dane są średnie. SEM. * P <0,001 w porównaniu do wartości wyjściowych. Ryc. 2Przepływ krwi z układu nerwowego (a) i opór naczyniowy (b), wyrażony jako względna zmiana w stosunku do linii podstawowej podczas infuzji tętniczej L-NMMA, a następnie ćwiczenie przedramienia (cid) [podobne: fitmed, kotlety mielone bez jajka, podkład match perfection ] [przypisy: zapalenie woreczka łzowego, glykopeel, poliploidalność ]