Skip to content

Zmniejszona miażdżyca w CX3CR1 / myszy ujawniają rolę fraktalkiny w aterogenezie

4 tygodnie ago

762 words

Cechą charakterystyczną wczesnej miażdżycy jest akumulacja makrofagów obciążonych lipidami w przestrzeni podśródbłonkowej. Krążące monocyty są prekursorami tych komórek piankowatych. a ostatnie dowody sugerują, że chemokiny odgrywają ważną rolę w kierowaniu migracji monocytów z krwi do ściany naczynia. Fractalkine (FK) jest strukturalnie nietypową chemokiną, która może działać albo jako rozpuszczalny czynnik chemotaktyczny, albo jako zakotwiczony przez błonę transbłonową receptor dla krążących leukocytów. Polimorfizm w receptorze FK, CX3CR1, wiązano ze zmniejszeniem częstości występowania choroby wieńcowej. Aby ustalić, czy FK jest krytycznie zaangażowany w aterogenezę, usunęliśmy gen dla CX3CR1 i skrzyżowaliśmy te myszy w apoE A /. tło. Tutaj donoszemy, że FK jest silnie eksprymowana w komórkach mięśni gładkich mięśnia gładkiego, ale nie w makrofagach, w apoE. /. myszy na diecie wysokotłuszczowej. CX3CR1. /. myszy mają znaczną redukcję rekrutacji makrofagów do ściany naczynia i zmniejszone tworzenie zmian miażdżycowych. Podsumowując, dane te dostarczają mocnych dowodów na to, że FK odgrywa kluczową rolę w aterogenezie. Wprowadzenie Infiltracja ściany naczynia przez monocyt jest wczesnym i niezbędnym krokiem w aterogenezie (1-3), ale sygnały rekrutujące i aktywujące monocyty / makrofagi nie są dobrze poznane. Fraktalkina (FK, CX3CL1) jest strukturalnie nowym białkiem, w którym rozpuszczalna domena podobna do chemokin jest połączona z szyjką mucyny, która rozciąga się przez błonę komórkową i do cytoplazmy (4). FK ulega ekspresji na aktywowanych komórkach śródbłonka (5), jest regulowany w górę przez aktywatory kinazy białkowej C (6) i został wykryty w ludzkich zmianach miażdżycowych (7). Jako białko transbłonowe pełnej długości, FK działa jak cząsteczka adhezyjna i skutecznie wychwytuje komórki w fizjologicznych warunkach przepływu (8, 9). Rozszczepienie łodygi mucyny FK w pobliżu połączenia z domeną przezbłonową daje rozpuszczalną postać FK (4, 10), która jest silnym chemoatraktantem dla monocytów i komórek T (4). Zdolność FK do przyciągania i zatrzymywania monocytów we krwi, jak również jej obecności w komórkach ściany naczynia, czyni go atrakcyjnym kandydatem do odgrywania kluczowej roli w tworzeniu komórek piankowatych. Sygnały FK poprzez aktywację siedmio-transbłonowej domeny, sprzężonego z białkiem G receptora znanego jako CX3CR1 (11). U ludzi, CX3CR1 jest wyrażany głównie na monocytach, limfocytach T i komórkach NK (11). Aby uzyskać wgląd w fizjologiczne role FK, ostatnio użyliśmy rekombinacji homologicznej do usunięcia CX3CR1 (12). Analiza CX3CR1. /. myszy ujawniły, że odrzucały transplantowane komórki MHC klasy I / II z niedopasowanymi sercami wolniej niż kontrolne zwierzęta z rodzaju dzikiego, i że ochrona ta była związana ze zmniejszoną infiltracją przez monocyty / makrofagi i komórki NK (12). Aby bezpośrednio zbadać rolę FK i CX3CR1 w aterogenezie, przeszliśmy przez CX3CR1. /. myszy z apoE. /. myszy i ilościowy rozwój zmian u potomstwa karmionych wysokotłuszczową dietą zachodnią. Tutaj donoszemy, że delecja CX3CR1 zapewnia znaczącą ochronę przed rekrutacją makrofagów i tworzeniem blaszki miażdżycowej. Metody Myszy. CX3CR1. / ., apoE. /. i CX3CR1 + / +, apoE. /. myszy wytworzono przez skrzyżowanie CX3CR1. /. myszy (12) z apoE. /. myszy (13) (N10 C57BL / 6; The Jackson Laboratory, Bar Harbor, Maine, USA). Późniejsze łączenie par CX3CR1 + / ., apoE. /. myszy urodziły zwierzęta, które weszły do badania. Wszystkie badane myszy stanowiły miot i miały około 92% C57BL / 6 i 8% 129 / Sv, w oparciu o liczbę krzyżówek wstecznych na tle genetycznym C57BL / 6. Genotypowanie dla CX3CR1 i apoE przeprowadzono za pomocą PCR (12). Wszystkie myszy trzymano w specjalnym obiekcie wolnym od patogenów. Myszy zostały odstawione od piersi w wieku 21 dni i karmione normalną karmą dla gryzoni zawierającą 4,5% tłuszczu (Ralston Purina Co., St. Louis, Missouri, USA) przez 2 tygodnie. W wieku 5 tygodni przerzucono je na dietę wysokotłuszczową typu zachodniego (0,15% cholesterolu, 21% bezwodnego tłuszczu mlecznego, Harlan Teklad Laboratory, Madison, Wisconsin, USA). Zarówno mężczyźni, jak i kobiety zostali włączeni do badania. Myszy utrzymywano na diecie wysokotłuszczowej przez 5, 10 lub 15 tygodni i ważono bezpośrednio przed uśmierceniem. Immunohistochemia. Aby ocenić zawartość komórkową zmian miażdżycowych w bliższej aorcie, wybarwiliśmy skrawki przeciwciałami dla makrofagów (MOMA-2 z BioSource International, Camarillo, Kalifornia, USA i CD11b z BD Pharmingen, San Diego California, USA), komórki NK ( klon 4D11, BD Pharmingen), komórki śródbłonka (CD144, VE kadheryna, BD Pharmingen) i komórki mięśni gładkich (SMC) (P-aktyna, klon 1A4, DAKO Corp., Glostrup, Dania)
[przypisy: atopowe zapalenie skory zdjecia, dieta dukana przepisy faza 1, odżywki na mase mięśniową ]
[przypisy: fitomed krem nawilżający tradycyjny, green ways jęczmień, fit med salon ]